亚洲欧洲日产国码无码久久99,欧美性人人天天夜夜摸,性久久久久久,男人激烈吮乳吃奶视频免费

免費咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > pei轉(zhuǎn)染試劑如何配置

pei轉(zhuǎn)染試劑如何配置

 更新時間:2023-04-23 點擊量:1846
 
  pei轉(zhuǎn)染試劑廣泛應(yīng)用于多種細胞系包括293、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2 和 Hela 細胞等。pei轉(zhuǎn)染試劑如何配置呢?
  一、pei轉(zhuǎn)染試劑配置前準備:
  (1)通過胰酶消化收集細胞,用適當?shù)耐阸培養(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。
  (2)根據(jù)細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完q后即可開始轉(zhuǎn)染。
  (3)轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。
  二、配置PEI-DNA混合物
  以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應(yīng)總體積為例。準備兩支1.5mL離心管,一管將質(zhì)粒DNA(總量2-8μg為佳)加入240μLHBS中,混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM,充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,充分混勻后于室溫靜置20-30min。
  三、pei轉(zhuǎn)染試劑配置后細胞孵育
  將420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養(yǎng)基中,輕輕搖動平皿混勻,置于含5%~7%CO2的37℃溫箱孵育。
  注:每次用100μM的核酸PEI轉(zhuǎn)染試劑儲存液前都需要先將其充分混勻,保證所取的濃度一致。
  四、pei轉(zhuǎn)染試劑配置后細胞培養(yǎng)
  培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預(yù)熱的含有血清的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng),16h左右可以觀測到報告基因的表達。
无码性午夜视频在线观看| 办公室高h荡肉呻吟| 成人精品一区二区三区不卡免费看| 乱lun合集1第40部分阅读| 亚洲色无码a片一区二小说| 啊灬用力灬啊灬啊灬啊灬a片男男| 藏精阁av无码亚洲av| 国产特黄a片aaaa毛片| 午夜精品久久久久久久99热蜜桃| 蜜桃成人无码区免费视频网站 | 网禁拗女在稀缺视频网站| 色情放荡肉欲小说免费听书| 医生的玩弄h羞耻诊疗h| 性调教室高h学校小说| 人妻出轨和黑人疯狂做国产人| 亚洲精品久久久久久| 大香伊在人线免| 色婷婷综合久久久久中文一区二区| 久久免费人成网站福利院| 无码精品人妻一区二区三区漫画| 四虎永久在线精品无码| 亚洲欧洲日韩综合色天使先锋| 国产亲妺妺乱的性视频播放| 真人高清实拍女处被破的视频| 国产人妻777人伦精品hd| 人妻换人妻仑乱| 国产美女裸体无遮挡免费视频| 一边摸一边叫床一边爽| 把腿张开老子臊烂你的小说| 大长腿白丝被c到爽哭视频| 久久国产精品无码一区二区三区| 天天躁日日躁狠狠躁av麻豆| 大学生第一次破苞疼哭了| 太大太粗好爽受不了| 狠狠色噜噜狠狠狠狠色综合久 | 久久热| 色婷婷国产精品视频一区二区三区| 狠狠躁夜夜躁人人爽碰AV| 少妇白洁小说在线阅读| 老太bbwwbbww高潮| 国产午夜精品一区二区三区嫩草|