抗原(antigen)是指能夠引起體內(nèi)抗體生成的物質(zhì),是外來的可誘發(fā)免疫反應(yīng)的物質(zhì)??乖山?jīng)過B細(xì)胞上的免疫球蛋白的辨識(shí)或者經(jīng)抗原呈現(xiàn)細(xì)胞的處理,與主要組織相容性復(fù)合體結(jié)合成復(fù)合物后,將T細(xì)胞活化,進(jìn)而引發(fā)連續(xù)的免疫反應(yīng)。
抗體(antibody)是指由于抗原的刺激,在體內(nèi)產(chǎn)生的具有保護(hù)機(jī)體作用的蛋白質(zhì)。由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,用來中和與鑒別外來物質(zhì)如病毒、細(xì)菌等。大部分抗體存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,還有的存在于B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面??贵w是免疫蛋白質(zhì),與抗原特異性結(jié)合,在宿主對(duì)細(xì)菌、病毒、真菌等感染性病原體的防御中發(fā)揮著作用。抗體呈Y型,其免疫功能是由它與抗原的結(jié)合能力決定的,抗原則是由細(xì)胞釋放的或在細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)的刺激免疫應(yīng)答反應(yīng)的分子。
抗體除在宿主免疫中發(fā)揮作用外,也廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究和治療方面。包括兩種類型的抗體——多克隆抗體和單克隆抗體。
一、多克隆抗體
1. 定義:多克隆抗體(polyclonal antibody, pAb)由多種抗原決定簇刺激機(jī)體,則產(chǎn)生出各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混合在一起就是多克隆抗體。也就是說,多克隆抗體就是用一種包含多種抗原決定簇的抗原刺激機(jī)體的多個(gè)B細(xì)胞分泌所產(chǎn)生的針對(duì)于多種抗原表位的不同抗體的混合物。所獲得的免疫血清實(shí)際上是含有多種抗體的混合物。
2. 制備方式:多克隆抗體由抗原免疫動(dòng)物后,從動(dòng)物的血清中純化獲得。
3. 多克隆抗體制備技術(shù)路線
特異性:多克隆抗體實(shí)際上是許多單克隆抗體的集合,它們的特異性參差不齊,基本符合正態(tài)分布曲線,總體表現(xiàn)為處于統(tǒng)計(jì)學(xué)正態(tài)曲線中位線(MID)的水平。
交叉反應(yīng):多克隆抗體由于針對(duì)目標(biāo)抗原的多個(gè)抗原表位,特異性低,具有生物多樣性,因此存在有相同或相似的抗原表位幾率高,出現(xiàn)交叉反應(yīng)的幾率也就較高。
二、單克隆抗體
1. 定義:由單一的B細(xì)胞經(jīng)過克隆產(chǎn)生的特異性強(qiáng)、高度均一的抗體。
2. 制備方式:單克隆抗體由抗原免疫動(dòng)物后,B淋巴細(xì)胞與無限增殖的骨髓瘤細(xì)胞相融合,篩選出單克隆的雜交瘤細(xì)胞,通過ELISA實(shí)驗(yàn)篩選出能產(chǎn)高效價(jià)抗體的單克隆雜交瘤細(xì)胞,通過培養(yǎng)單克隆雜交瘤細(xì)胞即可生產(chǎn)與抗原特異性結(jié)合的單克隆抗體。
3. 特異性:單抗制備的后續(xù)篩選過程,可以去除大部分的非特異抗體,保留幾株特異性較好的單克隆抗體,因此單克隆抗體具有更高的特異性。
4. 交叉反應(yīng):單克隆抗體具有極gao的特異性,因此存在有相同或相似的抗原表位幾率很低,進(jìn)而出現(xiàn)交叉反應(yīng)的幾率也低。
三、單克隆抗體和多克隆抗體的區(qū)別
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