亚洲欧洲日产国码无码久久99,欧美性人人天天夜夜摸,性久久久久久,男人激烈吮乳吃奶视频免费

免費咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項有哪些?

懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項有哪些?

 更新時間:2023-10-11 點擊量:1161

懸浮培養(yǎng)指的是一種在受到不斷攪動或搖動的液體培養(yǎng)基里,培養(yǎng)單細(xì)胞及小細(xì)胞團的組織培養(yǎng)系統(tǒng),那么懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項有哪些呢?讓我們一起來看看吧!

一、步驟

1. 將準(zhǔn)備好的凍存細(xì)胞放入37℃水浴中解凍。

2. 用70%乙醇對頂端進行消毒,用吸管將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有5mlwan全MEM-10培養(yǎng)基的25cm2組織培養(yǎng)瓶中,輕輕搖動培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞均勻分布于培養(yǎng)瓶中,放入5%CO2加濕培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)過夜。

3. 將培養(yǎng)基吸出,用0.5ml37℃的胰酶/EDTA覆蓋細(xì)胞,消化30~40s。

4. 加入10ml旋轉(zhuǎn)瓶wan全培養(yǎng)基-5,并將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至50ml的離心管中。室溫1800g離心5min,棄上清。

5. 將細(xì)胞沉淀懸浮在5ml的旋轉(zhuǎn)瓶wan全培養(yǎng)基-5中,上下吹打,將細(xì)胞團打散。

6. 在100ml或200ml通氣旋轉(zhuǎn)瓶中加入50ml旋轉(zhuǎn)瓶wan全培養(yǎng)基-5,并將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到瓶中。

7. 取出1ml細(xì)胞懸液,用血細(xì)胞計數(shù)器進行細(xì)胞計數(shù)。加入適量的旋轉(zhuǎn)瓶wan全培養(yǎng)基-5,使細(xì)胞密度為(3~4)×105細(xì)胞/ml。將細(xì)胞放入無CO2培養(yǎng)箱,37℃旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。

8. 隨后的兩天讓細(xì)胞繼續(xù)生長,并且每天對細(xì)胞進行計數(shù),加入適量的旋轉(zhuǎn)瓶wan全培養(yǎng)基-5以維持(3~4)×105細(xì)胞/ml的細(xì)胞密度。

9. 取1ml的細(xì)胞懸液,用血細(xì)胞計數(shù)器對細(xì)胞進行監(jiān)測。

10. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到(4~5)×105細(xì)胞/ml時,隔天或每天用培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋至1.5×105或2.5×105細(xì)胞/ml。

11. 分別將裝有50ml或100ml細(xì)胞懸液的100ml或200ml通氣旋轉(zhuǎn)瓶放入37℃無CO2培養(yǎng)箱旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。每天或隔天傳代。

二、注意事項

由于有些細(xì)胞是不能被養(yǎng)活的,所以需要高的初始密度。

更多有關(guān)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項,請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司:



扒开少年白嫩的屁股动态图| 亚洲av无码一区二区二三区软件| 老宋翁熄高潮怀孕| 国产成人亚洲精品| gogogo高清在线播放| chinesefree高潮抽搐| 乱肉黄蓉合集500篇| 国产动作大片中文字幕| 色欲av伊人久久大香线蕉影院| 我的私人女教师3| 超爆乳中文字幕巨爆乳| 欧美重囗味成人无码区| 吃奶呻吟打开双腿做受动态图| 亚洲看片lutube在线观看| 色琪琪女色窝77777| 无码h黄肉3d动漫在线观看| 亚洲 欧洲 日产| 婷婷综合另类小说色区| 国产精品女a片爽视频爽| 社保15年后每月拿多少| 扒开老师双腿猛进入白浆小说| 秋霞影院午夜伦a片欧美| 老头把舌头伸进粉嫩淑芬| 久久超级碰碰人妻人人妻| 双xing挨cao日常美人多汁| 中文字幕乱码中文| 强行无套内谢大学生初次| 欧美老妇激情xxxxxx按摩| 夜玩亲女裸睡的小妍h| 我和小峓子做爰hd完整版| av在线播放| 欧美精产国品一二三产品区别 | 够力七星彩排列五奖表最新版本| 精品人妻无码一区二区色欲产成人| 熟妇人妻中文字幕无码老熟妇| 亚洲第一综合天堂另类专| 亚洲精品无码高潮喷水a片软| 无码欧美xxxxx在线观看裸| 日韩av无码| 老师你的真嫩真紧av視頻| 国产精品揄拍100视频|