尿路感染(UTIs)影響著全球超過1.5億人,大多數(shù)女性一生中至少會(huì)經(jīng)歷一次急性膀胱炎發(fā)作。尿路感染是初級(jí)和二級(jí)保健中第二大常見的感染原因,但是,不同年齡階段表現(xiàn)出的不同臨床診斷癥狀,給診斷增加了難度(與黃金標(biāo)準(zhǔn)尿液培養(yǎng) 24-48 小時(shí)的檢測(cè)相比,精確度只有 50%-80%)1-3。原因不明的尿路感染而使用抗生素的病例占據(jù)了15%,這有可能導(dǎo)致抗生素過度使用而出現(xiàn)耐藥性。
以尿液為樣本的即時(shí)檢測(cè)(POC)可以大大改善尿路感染和其他疾病(如性傳染?。┑脑\斷和治療。但是,POC檢測(cè)的開發(fā)具有挑戰(zhàn)性,因?yàn)樗蟛僮鞣奖?,?jiǎn)單甚至無需樣本預(yù)處理,且在常溫下能保持穩(wěn)定性,同時(shí)必須具有和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)相同的靈敏度和特異性。
邁迪安的Lyo-ReadyTM可凍干尿液直擴(kuò)LAMP/RT-LAMP預(yù)混液是4x濃度、即用型的優(yōu)化配方,適用于從尿液樣本中直接進(jìn)行靈敏快速的DNA或RNA等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)。超qiang靈敏度和可重復(fù)性,TTR更快,NTC更延后。
(A) 使用Lyo-ReadyTM 可凍干尿液直擴(kuò)LAMP預(yù)混液的凍干體系 (MDX154,紅色) 對(duì)尿液樣本中的淋球菌、鉤端螺旋體、支原體、陰道毛滴蟲和單純皰疹病毒1型(HSV1)進(jìn)行擴(kuò)增;(B)使用 Lyo-ReadyTM 可凍干尿液直擴(kuò)RT-LAMP預(yù)混液的凍干體系 (MDX155,紅色) 對(duì)尿液樣本中的基孔肯雅病毒(CHIKV)、丙肝病毒(HCV)、西尼羅河病毒(WNV)、寨卡病毒(ZIKV)或黃熱病病毒(YFV)進(jìn)行擴(kuò)增。相同的反應(yīng)中使用NEB WarmStart®LAMP(橙色)和Thermo SuperScriptTM IV RT-LAMP(黑色)進(jìn)行性能對(duì)比。65°C下反應(yīng)60分鐘,檢測(cè)結(jié)果通過TTR顯示。誤差條代表三個(gè)技術(shù)重復(fù)間的標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果顯示,與NEB WarmStart®和Thermo SuperScriptTM IV相比,Lyo-ReadyTM 可凍干尿液直擴(kuò)LAMP/RT-LAMP預(yù)混液反應(yīng)靈敏度更高,擴(kuò)增更快速(TTR更短)且具有更高的特異性,在所有檢測(cè)的DNA和RNA病原體擴(kuò)增中NTC出現(xiàn)的更靠后。
chao強(qiáng)靈敏度可檢測(cè)1個(gè)拷貝DNA或50個(gè)拷貝RNA
(A) 使用凍干的Lyo-ReadyTM 可凍干尿液直擴(kuò)LAMP預(yù)混液(MDX154,紅色)對(duì)20%人體尿液樣本中10倍梯度稀釋的陰道毛滴蟲靶標(biāo)進(jìn)行直接擴(kuò)增(每反應(yīng)分別含有1,000、100、10和1個(gè)拷貝);(B)使用凍干的 Lyo-ReadyTM 可凍干尿液直擴(kuò)RT-LAMP預(yù)混液(MDX154,紅色)對(duì)5%人體尿液樣本中梯度稀釋的寨卡病毒RNA進(jìn)行直接擴(kuò)增(每反應(yīng)分別含有2000、500、100和50個(gè)拷貝)。相同的反應(yīng)中使用Lyo-ReadyTM 尿液直擴(kuò)LAMP預(yù)混液的液體體系(MDX154或MDX155,藍(lán)色),NEB WarmStart®LAMP (橙色)和Thermo SuperScriptTM IV RT-LAMP(黑色)進(jìn)行性能對(duì)比。65°C下反應(yīng)60分鐘,檢測(cè)結(jié)果通過TTR顯示。誤差條代表三個(gè)技術(shù)重復(fù)間的標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果顯示,Lyo-ReadyTM 可凍干尿液直擴(kuò)LAMP/RT-LAMP預(yù)混液比對(duì)比試劑具有更高靈敏度和特異性,擴(kuò)增更快速(TTR更短)且NTC出現(xiàn)的更靠后。
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