你知道什么是生物素親和素ELISA系統(tǒng)嗎?讓我們一來(lái)看看吧!
生物素親和素(又稱(chēng)抗生物素)系統(tǒng)(biotin avidin system,BAS)標(biāo)記抗體的技術(shù)是20世紀(jì)70年代后期發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫檢測(cè)方法。由于親和素與生物素間的親和力ji強(qiáng),結(jié)合迅速,且極其穩(wěn)定,生物素標(biāo)記抗體和酶的標(biāo)記率高,又不影響蛋白的活性,使BAS標(biāo)記技術(shù)比常規(guī)酶聯(lián)免疫、放射免疫及熒光免疫技術(shù)有著更高的靈敏度,為微量抗原、抗體的檢測(cè)開(kāi)辟了新的途徑。近年來(lái),在BAS檢測(cè)中多用鏈霉親和素“streptavidin,SA",它是鏈霉菌培養(yǎng)過(guò)程中的分泌物,完整的鏈霉親和素和從卵白中提取的親和素一樣,也由4條相同的肽鏈組成。因鏈霉親和素在檢測(cè)應(yīng)用中發(fā)生的非特異性結(jié)合遠(yuǎn)較親和素低,因此日漸受重視,已有取代親和素之勢(shì)。
BAS ELISA具有的特點(diǎn):
①對(duì)于所有的抗原抗體系統(tǒng),包括免疫細(xì)胞化學(xué)、ELISA、免疫印跡法等都適用,應(yīng)用范圍極廣;
②BAS在溫和條件下可與各類(lèi)生物大分子如蛋白質(zhì)、脂多糖等結(jié)合,并且這種結(jié)合對(duì)原生物大分子的生物活性無(wú)影響;
③每個(gè)親和素分子可與4個(gè)生物素分子結(jié)合,所以可以偶合更多連接生物素的酶分子,從而大大提高了靈敏度;
④生物素和親和素間親和力強(qiáng),故二者一旦結(jié)合,就極為穩(wěn)定,不受在ELISA方法中的保溫及多次洗滌影響,而且這種結(jié)合反應(yīng)時(shí)間比抗原抗體反應(yīng)所需時(shí)間短;
⑤結(jié)果專(zhuān)一性強(qiáng),非特異性顯色或染色背景極低;
⑥第一抗體稀釋度高,可節(jié)約抗體。
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