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Elabscience谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)活性熒光法測(cè)試盒(E-BC-F038)產(chǎn)品介紹

 更新時(shí)間:2024-03-20 點(diǎn)擊量:565

Elabscience谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)活性熒光法測(cè)試盒適用于檢測(cè)動(dòng)物組織樣本及血清(漿)等液體樣本中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)能夠催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸在丙酮酸氧化酶的作用下生成H2O2,在過(guò)氧化物酶作用下,將無(wú)熒光探針氧化為有熒光的物質(zhì),通過(guò)測(cè)定體系熒光值的增加量,即可計(jì)算出 ALT的活性。

試劑準(zhǔn)備

① 檢測(cè)前,所有試劑需平衡至室溫。

② 試劑三工作液的配制:

每支試劑三粉劑用1.2 mL試劑一充分溶解,置于冰盒上待用,可-20°C保存7天。

③ 1 mmol/L丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液的配制:

取10μL試劑五加入到990μL試劑一中,配制成1 mmol/L的丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液,臨用前現(xiàn)配現(xiàn)用。

④ 50μmol/L丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制:

按照1 mmol/L丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)配液:試劑一體積比為1:19的比例稀釋20倍,即得50μmol/L標(biāo)準(zhǔn)品溶液,按需配制,置于冰盒上待用。

⑤ 反應(yīng)工作液的配制:

按試劑一:試劑二:試劑三工作液:試劑四體積比為56:4:20:20 的比例混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配,避光保存,按需配制。

實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵點(diǎn)

① 試劑一取用時(shí)應(yīng)倒出部分,再取用,避免試劑污染。

② 樣本加入板孔中時(shí)應(yīng)觸底加入。

操作步驟

① 標(biāo)準(zhǔn)孔:向酶標(biāo)板對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)孔中加入 20μL 的不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品。

測(cè)定孔:向酶標(biāo)板對(duì)應(yīng)的測(cè)定孔中加入 20μL 的待測(cè)樣本。

② 向步驟①各孔中加入 100μL 的反應(yīng)工作液。

③ 酶標(biāo)儀上振板 5 s,室溫靜置 3 min,熒光酶標(biāo)儀上設(shè)置激發(fā)光波長(zhǎng) 535 nm,發(fā)射光波長(zhǎng) 587 nm,測(cè)定各孔熒光值,記為 F1,然后于室溫下避光靜置反應(yīng) 60 min,相同波長(zhǎng)條件下測(cè)定各孔熒光值,記為 F2,則△F = F2 - F1。

注:標(biāo)準(zhǔn)孔不需要求差值,直接取反應(yīng) 60 min 后測(cè)定的熒光值做標(biāo)準(zhǔn)曲線即可

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貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

E-BC-F038

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)活性熒光法測(cè)試盒

48T(32 samples)

96T(80 samples)


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