亚洲欧洲日产国码无码久久99,欧美性人人天天夜夜摸,性久久久久久,男人激烈吮乳吃奶视频免费

免費咨詢熱線:
技術文章
首頁 > 技術中心 > 蛋白表達的常見問題

蛋白表達的常見問題

 更新時間:2024-06-19 點擊量:689
  蛋白表達實驗的時,有時候實驗會覺得參考實驗方法和克隆的蛋白基因序列完q沒有問題,但蛋白電泳就是沒有結果。那么你知道蛋白表達的常見問題有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!
  1、載體構建錯誤,很多克隆新人常常弄錯讀碼框。比如Qiagen的pQE系列載體,其復制位點常有一兩個堿基的差異;另外有些酶產生粘端有些酶產生平端,這些都容易導致讀碼框錯誤,從而無法表達出來。
  2、宿主菌選擇不當。不同的宿主菌其基因型是不同的。有些經(jīng)過特殊修飾的載體,或者特殊用途的載體,或者有特殊啟動子的載體,必須選擇適合的宿主菌進行表達。因此,當你的蛋白沒有表達出來時,可以考慮更換宿主菌。
  3、密碼子的使用頻率較低。有些基因其本身含有許多罕見密碼子,尤其是起始密碼之后的15個堿基之內的罕見密碼子,對蛋白表達有著很重要的影響。優(yōu)化密碼子對原核表達似乎效果很好,對真核表達系統(tǒng)未必有很好的效果。
  4、質粒不穩(wěn)定或者質粒丟失。pET系統(tǒng)通常相對較穩(wěn)定。但是你選用帶氨芐青霉素抗性的載體時,也許有可能產生β-lactamase降解了抗生素,使質粒丟失。還有一種情況是表達重組的毒素蛋白,對宿主細胞也具有毒性,導致質粒丟失。這種情況在真核表達系統(tǒng)中較為常見。
  5、蛋白酶將蛋白降解了。這種情況通常由重組蛋白本身的N-或C-端序列引起。當?shù)鞍譔-端是Arg,Leu,Lys,Phe,Trp,或Tyr這些氨基酸時,容易受到蛋白酶降解,這就是所謂的N-末端規(guī)則。如果N-端是Met時,大腸桿菌可以偷偷地將這個Met去掉,尤其是Met之后緊跟著一個帶有小側鏈的氨基酸時。而C-末端存在非極性氨基酸時,也容易導致蛋白被降解。如果C末端最后5個氨基酸是極性的或者帶電荷的,則不容易被降解。
  6、二級翻譯起始位點。這種情況出現(xiàn)在你的序列中恰好包含與核糖體結合位點完q相同的序列。那就怪不得了,核糖體會非常高興地找到這個位點,然后開始翻譯,導致你的蛋白被截短,在電泳時無法看到預期大小的片段。
  更多有關蛋白表達的常見問題,請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司!
免费精品人在线二线三线区别 | 老七干白结33章| 粗大浓稠硕大噗嗤噗嗤h| 无限资源在线观看片中文在线| 学生无套内精做了一晚上| 亚洲国产成人精品无码区二本| 神马影院我不卡影院| 公车被奷到高潮突然停下| 欧美色精品人妻在线视频| 疼~好疼~进不去了| 五十路レンタのおばさん| 14表妺好紧没带套经过| 国产大屁股喷水视频在线观看| 久久国产欧美国日产综合抖音| 欧美午夜精品一区二区蜜桃| 成人午夜福利视频| 人交CZ00与女性XXX| 亚洲精品无码高潮喷水a片软 | 亚洲乱色熟女一区二区三区蜜臀| 日韩精品一区二区亚洲av观看| 人妻巨大乳hd免费看| 天美传媒剧国产剧情MV公司| 日韩精品人妻系列无码专区免费| 88久久精品无码一区二区毛片| 掀起裙子扶着巨物坐下去| 精品一区二区三区在线观看| 清纯校花被c得欲仙欲死| 国产欧美日韩综合精品二区| 日本无码小泬粉嫩有套在线| 国精产品源xzl仙踪林仙踪| 天天躁日日躁狠狠躁午夜剧场| 神马影院我不卡影院| 在公交车上弄到高c了怎么办| 69丰满少妇av无码区| 亚洲av无码专区在线播放中文| 第三书包h文辣文吃奶| 黑人大战中国av女叫惨了| 无码人妻丰满熟妇精品区| 特级毛片打开直接看| 婷婷大伊香蕉五月天视频| 蜜臀久久久久久999草草 |